Исследование антигена хеликобактер пилори в кале

Что такое — хеликобактер пилори?

Содержание:

Патогенный микроорганизм хеликобактер пилори (Н. pylori) вызывает следующие заболевания:

  • хронические гастриты — воспаление слизистой оболочки желудка
  • хронические дуодениты — воспаление 12-ти перстстной кишки
  • язвенную болезнь желудка (в 70% случаев) и двенадцатиперстной кишки (в 90% случаев)
  • хеликобактериоз
  • pак желудка
  • лимфому желудка

Заражены 70% населения, каждый третий!

Постоянное присутствие бактерии в желудке сопровождается следующими симптомами:

  • боль в области желудка после еды или перед приемом пищи
  • периодическая тошнота и даже рвота
  • чувство тяжести в желудке
  • изжога и привкус кислого во рту
  • неприятный запах изо рта
  • вздутие кишечника

Данные симптомы не просто снижают качество жизни, заставляют принимать длительное время медикаменты, но и могут привести к раку желудка!

хеликобактер пилори

Хеликобактер пилори способна «запускать» и другие заболевания, которые на первый взгляд не связаны с желудком — местом постоянного обитания бактерии. Например, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура — тяжелое заболевание со снижением числа тромбоцитов в крови и высокой вероятностью кровотечения.

Поэтому правильная диагностика текущей инфекции H.pylori крайне важна!

Преимущества

  • высокая специфичность и чувствительность (99%)
  • рекомендован как метод выбора у детей и взрослых
  • процедура проста как для пациента, так и для медицинского персонала
  • низкая цена и доступность
  • быстрое получение результата
  • без противопоказаний, осложнений и побочных эффектов

Показания

  • диагностика инфицированности хеликобактер пилори и контроль успешности лечения
  • симптомы диспепсии — боль или чувство дискомфорта (тяжесть, переполнение, раннее насыщение) в области желудка (под ложечкой)
  • симптомы хронического гастрита, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, гастроэзофагеальной рефлюксной болезни (ГЭРБ)
  • через 4-6 недель после окончания лечения хеликобактерной инфекции для контроля излеченности

Тест на антиген хеликобактер пилори в кале не рекомендован при отсутствии симптомов!

Принцип теста

С калом выделяются частички микробной стенки H.pylori, которые реагируют с соответствующим моноклональным антителом, что приводит к изменению окраски цветового индикатора.

Подготовка

  • за 2 недели до анализа на антиген H.pylori в кале нужно перестать принимать препараты висмута (Де-Нол, Улькавис), ингибиторы протонной помпы (омепразол, пантопразол, лансоопразол), антибиотики (любые)
  • не принимать препараты разжижающие стул
  • жидкий стул нельзя исследовать

Выполнение

Не сегодняшний день антиген хеликобактер пилори в стуле можно определять в условиях лаборатории или дома при помощи экспресс-тестов.

Специальный пластиковый контейнер на 1/3 заполняют калом, собранным в химически чистую посуду (не из унитаза, а из горшка). Контейнер помещают в пакет и относят для исследования в лабораторию. Образец можно хранить при температуре 2-8С до 24 часов.

В домашнем экспресс-тесте кал собирают в пробирку с растворителем, тщательно взбалтывают и несколько капель наносят в окно тест-касеты. Если появились две полоски — результат положительный, если одна на уровне контроля — отрицательный, если одна напротив теста или ни одной — тест не действителен. Время анализа 10 минут.

Норма

  • в норме антиген к хеликобактер пилори в кале не выявлен или отрицательный результат

Некоторые производители указывают также “серую зону” — когда результат невозможно оценить как положительный/отрицательный. В таком случае анализ рекомендовано повторить через 2 недели.

Дополнительные исследования

  • дыхательный тест
  • быстрый уреазный тест желудочного биоптата
  • бактериологический посев биоптата на хеликобактер пилори
  • патогистологическое исследование биоптата на H.pylori
  • антитела IgA, IgG, IgM к хеликобактер пилори
  • ПЦР анализ ДНК хеликобактер пилори

Механизм определения хеликобактера с помощью анализа кала

ПЦР (полимеразная цепная реакция), культуральный и иммунологические анализы кала относятся к прямым методам исследования. В отличие от косвенных методов, когда о наличии патологического агента судят по присутствию продуктов его жизнедеятельности или реакции иммунной системы организма (выработка антител), прямые методы обнаруживают непосредственно сам микроорганизм или его ДНК.
Все виды анализа кала на хеликобактериоз являются неинвазивными (нетравматичными) видами исследования в отличие от забора крови или гастродуоденоскопии.

Молекулярная диагностика

Амплификатор
Для проведения ПЦР используют специальный прибор — амплификатор

ПЦР-метод является одним из видов молекулярно-генетической диагностики и позволяет определить наличие Helicobacter pylori даже в случае присутствия в материале небольшого фрагмента ДНК бактерии.

Суть метода состоит в многократном умножении анализируемого образца возбудителя заболевания. Для проведения реакции необходим своего рода «каркас», состоящий из двух праймеров – полученных с помощью искусственного синтеза фрагментов ДНК, идентичных нуклеиновой кислоте Helicobacter pylori. Во время реакции между праймерами наращивается цепочка ДНК в случае присутствия в кале фрагмента биоматериала микроорганизма. В случае его отсутствия реакции не происходит.

Реакция проводится при определённых значениях температуры и кислотности среды, состоит из нескольких десятков повторяющихся циклов, для катализа (ускорения реакции) применяется специальный фермент – полимераза. За 30 циклов фрагмент ДНК патологического агента, присутствующий в биоматериале, умножается в миллиард раз, что позволяет с точностью диагностировать инфекцию.

При наличии соответствующих праймеров можно выявить инфицирование цитотоксичными (повреждающими клетки слизистой желудка) видами Helicobacter pylori.

Культуральный анализ

Культуральный анализ (бактериологический посев) является микробиологическим методом исследования.

Биологический материал помещается в специфическую среду, благоприятную для роста бактериальной колонии. По истечении определённого срока (для Helicobacter pylori – более недели) культуру изучают под микроскопом, используя для верной идентификации колонии различные методы – окраску, способность вступать в те или иные биохимические реакции.

Кроме выявления патологического антигена (возбудителя заболевания) метод позволяет провести тест на его чувствительность к антибактериальным препаратам, что сокращает сроки и затраты на лечение, повышает эффективность терапии.

К сожалению, в некоторых случаях результаты теста на чувствительность in vitro («в пробирке») могут не совпадать с результатами лечения in vivo (живого организма): в жизни антибиотики, подобранные лабораторным методом, могут быть не столь эффективны.

Иммунологические методы анализа

Иммунологические методы основаны на свойстве антител слипаться с антигеном. Для исследования антитела со специальными метками соединяются с анализируемым образцом, в результате, при наличии в материале Helicobacter pylori, образуются комплексы антиген-антитело.

Показания к проведению обследования

Все виды диагностики инфицирования Helicobacter pylori имеют свои преимущества и недостатки. Целесообразность применения того или иного метода зависит от разных факторов и этапов лечения. Оптимальный способ исследования выбирает врач-гастроэнтэролог.

Показания к ПЦР-анализу кала:

  • язвы, эрозии желудка и двенадцатипёрстной кишки;
  • атрофия слизистой оболочки желудка;
  • полипы, опухоли желудка;
  • гастроэзофагеальный рефлюкс (заброс содержимого желудка в пищевод), язва пищевода;
  • генетическая предрасположенность: злокачественные опухоли желудка у ближайших родственников (родителей, родных братьев и сестёр);
  • контроль эффективности антибиотикотерапии.

Исследование ПЦР-методом оптимально назначать для оценки целесообразности проведения специфического лечения антибактериальными препаратами при имеющихся органических повреждениях.

Показание к культуральному анализу – определение чувствительности к лекарственным препаратам при неэффективности эмпирического лечения. Поскольку анализ является сложным (посев требует специальной среды и отсутствия доступа кислорода) и долгосрочным, это исследование не назначается для диагностики инфекции.

Бактериологический посев способен выделять только спиралевидные формы Helicobacter pylori, но не кокковые, получившие в последнее время широкую распространённость. Этот факт дополнительно снижает ценность исследования.

Показания к иммунологическим методам:

  • симптомы функциональных и органических патологий желудка и кишечника:
    • метеоризм, изжога, отрыжка;
    • боли, имеющие периодичность в течение суток с обострениями весной и осенью;
    • поносы или запоры;
    • ощущение дискомфорта, переполнения желудка;
  • перед назначением длительной терапии нестероидными противовоспалительными препаратами или ингибиторами протонной помпы (средствами для снижения выработки соляной кислоты);
  • железодефицитная анемия или тромбоцитопения невыясненной этиологии;
  • генетическая предрасположенность;
  • инфицирование ближайшего окружения;
  • контроль эффективности антибиотикотерапии.
Читайте также:  Прививка от клещевого энцефалита, сделать прививку от энцефалита в Москве

Иммунологические методы и ПЦР без генотипирования назначаются с целью скрининга – ввиду простоты и относительно низкой стоимости исследование проводится широким массам населения для выявления группы риска развития органических и опухолевых поражений желудка и кишечника.

К сожалению, в России скрининг на Helicobacter pylori не получил широкого распространения.

Иммунологический анализ проводится до инструментальных методов исследования при соответствующей симптоматике и позволяет предположить инфицированность Helicobacter pylori. По результатам анализа в случае необходимости назначаются другие методы исследования.

Преимущества и недостатки ПЦР-анализа кала

Специфическая терапия хеликобактериоза антибактериальными препаратами – процесс длительный, сопровождающийся плохой переносимостью у многих больных и высоким риском развития осложнений.

Назначение антибиотиков всем лицам, инфицированным Helicobacter pylori, — порочная практика. Специфическая антибиотикотерапия показана лишь пациентам с тенденцией к прогрессированию органических поражений – эрозий, язв, атрофического процесса, — как правило, заражённым определёнными штаммами хеликобактера. Этим больным требуется антибиотикотерапия с целью достижения ремиссии при язвенной болезни и предупреждения риска развития злокачественных новообразований.

Выявить цитотоксичные типы Helicobacter pylori можно только посредством ПЦР-метода.

Преимущества ПЦР-анализа кала:

  • высокая чувствительность метода;
  • высокая специфичность теста;
  • простота и неинвазивность забора материала;
  • безопасность;
  • возможность выделения как спиралевидных, так и кокковых форм Helicobacter pylori;
  • возможность выделения различных штаммов бактерии.

Чувствительность теста – способность к выдаче истинно положительных результатов. Чем выше чувствительность, тем ниже доля ложноположительных результатов, когда антиген якобы выявляется у неинфицированных лиц.

Специфичность теста – показатель, зависящий от количества ложноотрицательных (когда у инфицированного больного антиген не выделяется) результатов исследования. ПЦР-метод исследования кала на Helicobacter pylori характеризуется чувствительностью 64–94% и стопроцентной специфичностью.

Собрать кал легко и просто. В отличие от забора крови или гастродуоденоскопии взятие материала не требует применения местных анестетиков, на которые может развиться аллергическая реакция, не причиняет боли и дискомфорта, безопасно в плане заражения «грязным» инструментом. Исследование не требует приложения определённых усилий, как, например, дыхательный метод, что делает его доступным даже для маленьких детей.

Недостатки ПЦР-анализа кала:

  • отсутствие возможности определения чувствительности к антибактериальным препаратам;
  • отсутствие возможности различать текущую инфекцию и успешно излеченную, когда фрагменты ДНК бактерии могут оставаться в фекалиях около месяца;
  • более низкий показатель чувствительности по сравнению с исследованием биоптата (образца ткани или клеточной массы) слизистой желудка;
  • относительно высокая стоимость анализа с генотипированием;
  • строгие требования к персоналу: квалификация, неукоснительное соблюдение правил, аккуратность.

Один из основных недостатков ПЦР-метода является продолжением его основного достоинства: высокая чувствительность теста является причиной ложноположительных результатов в случае контаминации («загрязнения» извне) анализируемого материала.

Подготовка к сдаче анализа

Достоверность результата любого анализа зависит от чёткого выполнения определённых условий на всех этапах, и забор материала – не исключение.

Правила взятия материала:

  • за трое суток до анализа отменяются антибиотики, слабительные, замедляющие перистальтику препараты, ректальные свечи и некоторые другие лекарства по наставлению врача, поэтому следует предупредить доктора о применении тех или иных лекарственных препаратов;
  • сбор кала осуществляется в выданную лабораторией посуду, рекомендуется отбирать пробы из трёх разных точек;
  • биоматериал желательно доставить в лабораторию немедленно; в случае отсутствия такой возможности пробу следует хранить при температуре 2–8 градусов не дольше 24 часов;
  • если анализ выполняется для оценки эффективности назначенной ранее антибиотикотерапии против Helicobacter pylori, кал собирается не ранее, чем через четыре недели после окончания лечения.

Замедление пассажа каловых масс, запоры могут приводить к разрушению хеликобактера в фекалиях, что является причиной ложноотрицательных результатов. Для повышения достоверности результата врач может назначить перед анализом лёгкое слабительное – лактулозу.

Как и где сдать анализ

Анализы назначает гастроэнтеролог, поэтому перед исследованием на Helicobacter pylori необходима его консультация.

Примерная стоимость исследования кала:

  • ПЦР-метод с генотипированием – 1200 рублей;
  • ПЦР без генотипирования – 600 рублей;
  • чувствительность к антибиотикам – 600 рублей;
  • иммунологические методы – 400–650 рублей (в зависимости от метода).

Для наиболее точной диагностики Helicobacter pylori необходимо выбирать медицинское учреждение, заслужившее хорошую репутацию.

Что представляет собой Helicobacter pylori

Это спиралевидная форма паразитарных микроорганизмов, локализующихся в слизистой оболочке желудка (в нижнем его отделе — привратнике). Эти бактерии обладают возможностью укрываться от антител, быстро перемещаясь. Им удается при помощи щупалец прикрепиться к стенкам желудка, где они пребывают в спокойном состоянии до определенного времени.

Ослабление иммунитета становится предпосылкой для дальнейшего проникновения хеликобактерной инфекции в 12-перстную кишку, что провоцирует воспалительные процессы и серьезные патологии желудочно-кишечного тракта.

Пути распространения

Очень опасная для человека бактерия проникает в пищеварительную систему простейшим образом:

бактерии в желудке

  • через посуду;
  • при несоблюдении правил личной гигиены;
  • через слюну, поцелуй.

Носители бактерии не всегда испытывают дискомфорт и недомогание, у многих из них отсутствуют характерные для хеликобактериоза симптомы. Это объясняется способностью бактерии пребывать длительное время в спящем состоянии и никак не проявлять себя.

Пусковым механизмом, провоцирующим вредоносное воздействие инфекции, может стать отсутствие правильного питания, стрессы и игнорирование элементарных гигиенических навыков.

Чтобы предотвратить разрушительную деятельность Helicobacter pylori, следует провести ряд диагностических мероприятий по ее выявлению.

В каком случае необходимо сделать анализ

Показанием к проведению анализов являются жалобы пациента на проявляющиеся функциональные нарушения в работе пищеварительного тракта. Тревожными сигналами становятся следующие симптомы:

жжение в пищеводе и груди

  • болевые ощущения при большом перерыве между трапезами, стихающие непосредственно после еды;
  • частые приступы изжоги;
  • неприятие белковых (особенно мясных) блюд вплоть до рвоты;
  • желудочное недомогание, ощущение тяжести;
  • дискомфорт от застаивания пищевого комка в желудке;
  • слизь в каловых массах;
  • отсутствие аппетита.

Подобные симптомы указывают на явное неблагополучие в пищеварительной системе. Оно может быть вызвано активизацией бактерии, своевременное обнаружение и ликвидация которой помогут предупредить серьезные осложнения.

Методы диагностики

Определение наличия болезнетворного микроорганизма в желудке возможно при использовании таких эффективных способов диагностики, как:

  1. Исследование кала методом ПЦР (полимеразная цепная реакция). Это простой и в то же время очень чувствительный способ диагностирования инфекции в организме. В его основе – исследование фрагмента ДНК бактерии Helicobacter pylori, являющегося носителем наследственной информации. Обнаружение возбудителя инфекции с помощью молекулярной генетической диагностики позволяет определить его наличие даже в том случае, если в пробе есть всего несколько молекул ДНК бактерии. Метод отличается отсутствием каких-либо неудобств и болезненных ощущений. Этот бактериологический анализ определяет наличие паразитов исключительно точно (до 90-95%).
  2. ИФА – иммуноферментный анализ. Антиген Helicobacter pylori в ответ на появление возбудителя инфекции начинает вырабатывать иммуноглобулины (антитела). ИФА определяет в крови присутствие антител к паразитарной инфекции. Если они обнаружены, значит, иммунные силы опознали инфекцию и стараются вырабатывать защитные средства. Наличие в тесте иммуноглобулинов IgG, IgM, IgA говорит о необходимости продолжить обследование, чтобы выяснить, насколько велико отклонение от нормы и опасно ли присутствие бактерии в организме для здоровья пациента.

С этой целью используется метод Вестерн-блоттинг, который рекомендуется при обнаружении антител к паразитарной инфекции. Ценность его заключается в том, что он дает возможность получить дифференцированные сведения об антителах и их количестве.

В качестве биоматериала для гемотеста используется кровь из вены.

Другие методы обнаружения паразита

Несмотря на то что результаты ПЦР кала и ИФА считаются наиболее точными лабораторными данными, в некоторых случаях прибегают к дополнительным диагностическим процедурам.

В качестве вспомогательного обследования могут быть использованы следующие меры:

дыхательный тест

  1. Уреазный респираторный тест. Диагностирование хеликобактерной инфекции при помощи него основывается на выделении бактерией особого вещества – уреазы, которая и защищает ее от агрессивного влияния соляной кислоты. Наличие в дыхательном тесте аммиака и углекислого газа, образующихся в результате воздействия уреазы на мочевину, дает возможность сделать вывод о присутствии в организме паразитарной инфекции. Такой тест рекомендуется проводить малышам и беременным. Он удобный и безопасный.
  2. Уреазный экспресс-тест. Исследование аналогично предыдущему тесту. Но в качестве материала для пробы берется соскоб со слизистой оболочки желудка. Он исследуется в среде, содержащей мочевину.
  3. Биопсия и гистология. Способ отличается исключительной достоверностью анализа, не допускает ложноположительного результата. Материал для обследования берется с участков слизистой оболочки желудка, на которых предполагается большая степень заселенности микроорганизмами.

Чтобы получить наиболее точную информацию о наличии/отсутствии хеликобактер пилори, используются два или три метода исследования.

Достоверность результатов анализа кала

К сожалению, ни один из вышеперечисленных методов не может со 100-процентной гарантией указывать на присутствие в организме инфекции этого типа.

Читайте также:  Хламидиоз у женщин – симптомы, первые признаки, лечение

Не является исключением и исследование кала с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Объясняется это не недостаточной эффективностью самого метода, а факторами, способными привести к неточному диагностированию.

Среди них следует отметить такие ситуации:

врач и пробирка с калом

  1. Анализируемый фрагмент кала может содержать различные компоненты, влияющие на результат определения наличия бактерии. Это присутствие в пробе крови, неорганических солей и других веществ.
  2. Положительный, равно как и отрицательный, результат может быть спровоцирован приемом антибиотиков (Метронидазола, Тетрациклина) и других медикаментозных препаратов.
  3. Чаще всего неточность наблюдается вследствие неправильной подготовки пациента к анализу или ошибок при сборе материала.

Именно поэтому рекомендуется использование нескольких методов исследования биологического материала.

Как правильно сдать анализы

Достоверность результата напрямую зависит от трех факторов:

  • соблюдения рекомендаций по подготовке к анализу;
  • точности выполнения правил сбора биоматериала;
  • своевременной сдачи пробы на исследование.

Существенная роль в обеспечении точности результатов отводится и качественному обследованию кала в лаборатории.

Правила подготовки

Выполнение простых, но важных требований даст возможность вовремя распознать наличие хеликобактерной бактерии в организме. В процессе подготовки необходимо:

  • исключить прием антибиотиков за 30 дней до обследования;
  • за 3-5 дней до сбора материала не использовать в пищу продукты, способные изменить цвет фекалий (черную смородину, красную свеклу и вино);
  • отказаться в этот же период от употребления блюд, приготовленных из мяса, рыбы капусты, свеклы, редиса, моркови;
  • следует также исключить прием лекарственных средств, вызывающих ускорение процесса дефекации, так как они провоцируют изменение каловых масс и влияют на результаты.

Следует воздержаться от сбора биоматериала во время менструального цикла. Не рекомендуется делать это после клизмы, исследования толстой кишки или рентгена пищеварительного тракта.

Как собирать биоматериал

Чтобы собрать материал, необходимо использовать специальный контейнер. Его можно приобрести в лаборатории или аптеке. Не следует заполнять емкость полностью, достаточно будет поместить в нее не более ½ ч. ложки кала. Это составит около трети контейнера.

стерильная пробирка под кал

Использование нестерильных емкостей может привести к неточностям исследования. Не следует сдавать кал, на котором имеются следы мочи или крови.

Важно знать, как правильно сдать анализ в лабораторию. Чем быстрее биоматериал будет туда отправлен, тем точнее будет анализ. Превышение времени хранения (норма составляет не более 8 часов) и температурного режима (в диапазоне от + 3 до –7 °C) недопустимо.

Как расшифровать и оценить результат анализа

Посев биоматериала на присутствие в организме бактерии хеликобактер пилори методом ПЦР показывает два варианта: положительный (инфекция обнаружена) и отрицательный результат (она отсутствует).

Положительный анализ не всегда говорит о том, что обнаруженный в кале хеликобактер активен. Он может указывать и на его присутствие в состоянии покоя. Дифференциация возможна только при получении результатов исследования крови на Helicobacter pylori методом ИФА.

Каждый метод имеет свои преимущества. Так, ПЦР обнаруживает самое незначительное количество бактерий, а ИФА устанавливает, на какой стадии развития находится патологический процесс.

Получив данные анализов, не следует заниматься гаданием о том, что бы это значило. Нужно немедленно сдать результаты гастроэнтерологу. Их расшифровка – прерогатива грамотных специалистов, которые сделают ее квалифицированно, оценят меру опасности для пациента и назначат адекватный курс терапии.

О лечении

С целью уничтожения бактерии наиболее эффективно использование антибиотиков – Амоксициллина и Кларитромицина.

Амоксициллин

Они применяются, если у пациента выявлены такие патологии, как язва, гастрит и другие нарушения в деятельности ЖКТ.

Игнорирование этих заболеваний может привести к высокому риску развития необратимых последствий из-за возможности возникновения онкологических процессов.

Что представляет собой хеликобактерия?

Название Helicobacter pylori переводится как «спиралевидная привратниковая». Оно привязано к характерной форме бактерии, локализации в области привратника (приграничная зона желудка с двенадцатиперстной кишкой). Микроорганизм имеет жгутики, помогающие ему перемещаться даже в густой слизи.

Хеликобактерия способна выдерживать кислую среду желудочного сока. Для жизнеобеспечения использует энергию молекул водорода, которую вырабатывают кишечные бактерии.

Хеликобактер пилори

Бактерия синтезирует около 20 ферментов

Наиболее известные ферменты хеликобактер:

  • оксидаза,
  • уреаза,
  • каталаза.

К особенностям микроорганизма относятся:

  • сложность выделения культуральным способом, поскольку хеликобактерия не растет на обычных питательных средах;
  • длительный период отсутствия симптоматики, указывающей на заражение;
  • возможность в «опасной» ситуации трансформироваться в шаровидную форму и покрываться защитной пленкой.

Агрессивность бактерии является основной причиной атрофической формы хронического гастрита с дальнейшим переходом в язвенную болезнь и раковую опухоль.

В кале спиралевидную форму обнаружить невозможно, поскольку кишечная среда неблагоприятна для существования хеликобактерии. Здесь не имеется нужной кислотности, мало кислорода, действуют сильные разрушающие ферменты желчи, поджелудочной железы. Поэтому в каловых массах находится кокковая форма бактерии.

Способ бактериологического посева

Выделение культуры возбудителя — микробиологический вид исследования. Классика способа требует посева материала на питательную среду, подсчета выросших колоний, исследования микроорганизма из колонии под микроскопом. Также необходимо проведения биохимических проб для изучения его свойств и дополнительного посева на среду с антибиотиками для выявления чувствительности к разным препаратам.

Среда для посева

Среда для посева довольно дорогая, готовится специально

Анализ кала на хеликобактер пилори с помощью культурального способа провести сложно:

  • посев должен проходить без доступа кислорода;
  • можно выделить только спиралевидные формы, которые редко попадают в кал, а не кокковые;
  • результаты реакции на чувствительность к антибиотикам in vitro (инвитро означает «на стекле, в пробирке») на практике оказываются обманчивыми и в некоторых случаях не совпадают с фактическим применением у пациента (in vivo), обнаруженный оптимальный антибиотик оказывается недостаточно эффективным;
  • анализ требует длительного срока (7–10 дней) для полного проведения.

По этим причинам использование метода для диагностики ограничено.

Иммунологические способы исследования

Суть иммунологического анализа — выявление комплексов антитело+антиген, в котором чужеродным агентом является хеликобактерия. Более привычно использование по исследованию крови. Но фактически косвенные признаки наличия антигена можно подтвердить по наличию в стуле, слюне, моче, у беременных в околоплодной жидкости.

В методиках используются готовые «помеченные» антитела. При обработке ими кала пациента, содержащего антигены (остатки хеликобактерии) возникает реакция соединения со стандартными антителами. Длительность исследования — сутки. Анализ кала на антиген хеликобактер назначается, если у пациента имеются любые симптомы нарушения пищеварения.

Наиболее распространенный вариант — первичный скрининг населения (обследование всех обратившихся или определенных групп), не имеющего специфических жалоб. В России не применяется из-за отсутствия достаточного количества иммунологических тестов в лабораториях поликлиник.

Метод ПЦР

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) относится к молекулярно-генетической диагностике. С ее помощью выявляется не бактерия, а ее специфическая ДНК. Даже при малом количестве, в случае выздоровления или бессимптомного носительства метод позволяет с достаточной точностью связать изменения в организме с действием хеликобактер.

ПЦР-лаборатория

Длительность анализа экспресс-методом 5–6 часов, обычным — 2–3 суток

Методика рассчитана на искусственный синтез отдельных частей ДНК, удвоение и построение цепочки из 30 циклов. Процесс не происходит в случае отсутствия малейших остатков биоматериала. Для реакции необходим прибор ампликатор. Полимераза — фермент, ускоряющий процесс.

ПЦР кала назначают для подтверждения роли хеликобактерии в патологии и определения целесообразности специфической терапии:

  • при эрозиях и язвах в желудке, пищеводе и двенадцатиперстной кишке;
  • желудочно-пищеводном рефлюксе (заброс содержимого в обратном направлении);
  • атрофическом поражении слизистой желудка;
  • полипах;
  • опухолях желудка;
  • выявлении наследственной предрасположенности в случае наличия у родственников злокачественных опухолей органов пищеварения;
  • контроле за результатами терапии антибиотиками.

Преимуществами ПЦР кала можно считать:

  • высокую чувствительность и специфичность (соответственно определяются в 94% и 100%), реакция бывает положительной даже при наличии 10 бактерий;
  • простоту проведения;
  • безопасность для пациента, отсутствие травматичности при заборе материала;
  • возможность определения ДНК как в спиралевидных, так и в кокковых формах хеликобактерии;
  • выделение и изучение различных генетических модификаций, штаммов.

Результат редко выдает ложноположительную информацию при отсутствии инфицированности человека.

Недостатки исследования:

  • не представляется возможность определения оптимального антибиотика по чувствительности;
  • нет различий между протекающим острым заболеванием и остаточными явлениями после обострения, ДНК бактерий остаются в кале почти месяц после клинического выздоровления;
  • чувствительность все-таки ниже, чем при исследовании биоптата из стенки желудка;
  • сравнительно высокая стоимость;
  • необходимость подготовки персонала и приобретения оборудования;
  • положительная реакция в случаях загрязнения персоналом материала из чужого образца (контаминация извне).

Микроскоп

ПЦР-лаборатория имеет усовершенствованную технику, позволяющую получить достоверные результаты диагностики

Как оценить результаты анализов?

Расшифровка результатов исследования — дело врача специалиста. Не стоит прибегать к самостоятельной трактовке или пользоваться услугами знакомых. Оценка проводится по комплексу признаков. При ПЦР выдается результат:

  • отрицательный, если не выделился генотип хеликобактерии, обнаруживается в норме;
  • положительный, если у пациента разгар заболевания или заражение было в анамнезе.
Читайте также:  Очищение кишечника медом с водой: пошаговая инструкция

При бактериологическом исследовании:

  • выявлено нулевое количество бактерий или хеликобактер отсутствует;
  • если количество микроорганизмов больше нуля — подтверждается хелибактериоз;
  • знак S означает чувствительность к заявленному антибиотику;
  • R — указывает на устойчивость (резистентность) к препарату;
  • I — чувствительность умеренная.

Бакпосев кала позволяет дать не только качественную, но и количественную характеристику хеликобактериального заражения. Для этого учитываются степени роста бактерии:

  • 1 степень — наблюдается слабый рост на жидкой среде, на твердых образцах — роста нет;
  • 2 степень — вырастает до 10 колоний;
  • 3 степень — число выросших колоний достигает 100;
  • 4 степень — распространенность и активность возбудителя очень активны, вырастает более 100 колоний.

Последние две степени считаются наиболее достоверными источниками информации об участии хеликобактер в патологических изменениях желудка.Анализ на хеликобактер пилори

Тестирование проводят методом иммуноферментного анализа со стандартными сыворотками

Иммунологические тесты показывают отрицательный результат, если антиген возбудителя не определяется, положительный — при наличии хеликобактериоза. Достоверность иммунологического и культурального методов значительно уступает ПЦР, для их проведения необходима массивная распространенность возбудителя в фекалиях.

1. Кому рекомендуется проверить анализ кала на хеликобактерию?

Хеликобактер пилори длительное время присутствует в организме бессимптомно. Признаки нарушения функционального состояния желудочно-кишечного тракта проявляются только при активной жизнедеятельности бактерий. Одним из основных провоцирующих факторов является снижение иммунитета.

При наличии у пациента определенных заболеваний или отдельных симптомов процедура анализа на хеликобактериоз становится обязательной.

Показания к анализу:

  • проведение антибактериальной терапии (для контроля результатов лечения);
  • эрозии и язвы двенадцатиперстной кишки или желудка;
  • симптомы нарушения функционального состояния пищеварительного тракта (регулярные запоры или диарея, метеоризм, болевые ощущения различной локализации);
  • генетическая предрасположенность к заболеваниям, провоцируемым хеликобактер пилори (злокачественные опухоли органов пищеварения, хронические патологии пищеварительного тракта);
  • прогрессирующая атрофия слизистых оболочек желудка;
  • регулярные болевые ощущения в желудке после употребления пищи;
  • железодефицитная анемия;
  • резкое снижение массы тела в сочетании с другими симптомами отклонений в функциональном состоянии пищеварительного тракта;
  • наличие крови в рвотных или каловых массах;
  • выявленные новообразования и полипы в пищеварительной системе;
  • язва пищевода или гастроэзофагеальный рефлюкс.

Рекомендуем посмотреть видео:

2. Как правильно сдавать анализ?

Проведение процедуры исследования каловых масс на наличие патогенных бактерий подразумевает соблюдение ярда правил. Если подготовка к анализу или сбор биологического материала будут совершены неправильно, то результаты тестов могут показать ложный результат. Каловые массы имеют определенный срок хранения. Если материал будет доставлен в лабораторию с нарушением сроков, то тестирование также может стать недостоверным.

Этапы сбора кала на анализ.
Этапы сбора кала на анализ.

Подготовка к сдаче анализа

Подготовительные меры для анализа кала на хеликобактер пилори включают в себя рекомендации по соблюдению определенного режима питания, а также корректировку медикаментозной терапии (при ее наличии). Если прием назначенных препаратов временно прекратить не получается, то данный нюанс обязательно сообщается врачу.

Вещества, содержащиеся в антибиотиках и других категориях медикаментов, могут стать причиной неправильной расшифровки данных исследования.

Рекомендации:

  • Медицинские одноразовые контейнеры для сбора кала для анализа.
    Медицинские одноразовые контейнеры для сбора кала для анализа.за несколько дней до процедуры следует прекратить прием слабительных или антацидных средств;
  • в течение месяца до проведения теста пациент не должен принимать антибактериальные препараты;
  • нельзя в течение нескольких дней употреблять продукты с содержанием грубой клетчатки (свекла, капуста, редис, редька);
  • в течение трех дней до процедуры из рациона исключаются крепкий чай, кофе, острые специи и приправы, овощи и фрукты красного или оранжевого цвета);
  • блюда в течение трех дней перед анализом рекомендуется готовить только методами варки, тушения или паровой обработки;
  • несколько дней нельзя употреблять алкогольные напитки.

Подготовка тары

Стерильную емкость для сбора биологического материала можно приобрести в аптеке. При покупке такой баночки исключается наличие загрязнений. В качестве альтернативы можно использовать другие варианты тар (например, емкости от детского питания). Важным нюансом является их стерильность. Емкости должны быть максимально очищены от любых видов загрязнений.

Сбор материала

Запрещено собирать каловые массы с памперса или из унитаза. Идеальным вариантом является забор биологического материала из горшка или с полиэтиленового пакета. Емкость для хранения кала должна быть заполнена на одну третью часть. К таре обязательно прикрепляется заполненное направление.

Как и сколько можно хранить материал?

Емкость с каловыми массами доставляется в лабораторию как можно быстрее. Если возможность быстро направить материал для анализа отсутствует, можно воспользоваться двумя вариантами хранения. В первом случае каловые массы однократно замораживаются. Во втором – хранятся не более двух суток при температуре не выше 4 градусов.

3. Тактика определения бактерии хеликобактер с помощью анализа кала

Назначением конкретного анализа на хеликобактериоз занимается врач. Специалист учитывает индивидуальную клиническую картину состояния здоровья пациента. Сдать анализы на хеликтобактериоз можно самостоятельно, если возникают подозрения на функциональное отклонение пищеварительного тракта.

Отклонение показателей анализа может свидетельствовать о наличии патологии в органах ЖКТ.
Отклонение показателей анализа может свидетельствовать о наличии патологии в органах ЖКТ.

Молекулярная диагностика

При молекулярном анализе выявляется специфическая ДНК бактерии. Код дублируется на специальном аппарате. При достижении бактерией нужного размера, ее сравнивают с этанолом. Если части ДНК совпадают с оригиналом, то результат теста положительный (хеликтобактериоз выявлен). Методика отличается высокой степенью информативности.

Культуральный анализ

Бактериальный посев (или культуральный анализ) относится к категории микробиологических методов исследований. В процессе поведения процедуры биологический материал помещается в среду, которая является максимально благоприятной для размножения патогенных микроорганизмов. Через неделю каловые массы изучаются с помощью микроскопа.

Для идентификации хеликобактер пилори учитываются окраска бактерий и их способности вступать в определенные реакции.

Особенности методики:

  • процедура позволяет выявить патологический антиген;
  • в процессе изучения биологического материала проводится тест на чувствительность к антибактериальным препаратам;
  • результаты исследования позволяют подобрать максимально эффективную схему терапии.

Определение антигена хеликобактер пилори в кале иммунологическим методом

Главной целью проведения иммунологических тестов при выявлении хеликобактер пилори является определение комплексов антиген + антитело. Для исследования используются помеченные антитела. Вступая в реакцию с калом, такие вещества подвергаются определенным изменениям. Антитела способны определить наличие в каловых массах не только патогенные бактерии, но и их части, а также продукты жизнедеятельности.

Достоинства и недостатки ПЦР-диагностики

ПЦР-диагностика имеет ряд достоинств и недостатков. Некоторые виды патогенных бактерий можно выявить только с помощью данной методики (например, цитотоксичные типы микроорганизмов). Сбор материала для анализа не подразумевает причинение боли или дискомфорта пациенту. Процедура показывает максимально достоверные результаты.

Преимущества методики:ПЦР-анализ один из самых достоверных методов диагностики, который может выявлять разные формы хеликобактерии.
ПЦР-анализ один из самых достоверных методов диагностики, который может выявлять разные формы хеликобактерии.

  • процедура позволяет выявить различные штаммы патогенных бактерий;
  • метод отличается высокой степенью чувствительности;
  • анализ безопасен для пациента (для сбора материала не применяются медицинские инструменты);
  • неинвазивность и простота процесса забора биологического материала;
  • высокая степень специфичности теста;
  • метод позволяет определить не только спиралевидные, но и кокковые типы бактерий.

Высокая степень чувствительности теста является его одновременным достоинством и недостатком. Анализ с точностью определяет наличие бактерий, но при загрязнениях биологического материала или тары, результаты процедуры могут быть ложноположительными.

Для исключения ложных показателей следует соблюдать все правила сбора каловых масс для проведения их исследования.

Другие недостатки:

  • относительно высокая цена процедуры;
  • отсутствие возможности определить чувствительность бактерии к антибактериальным препаратам;
  • более низкий показатель чувствительности в сравнении с процедурой исследования биоптата слизистой оболочки желудка.

Анализ кала на антиген хеликобактер пилори инвитро

Процедуры исследования каловых масс осуществляются вне организма пациента («ин витро» – «в стекле», «в пробирке»). Для обнаружения микроба такие методы являются максимально точными и эффективными. Однако процедуры имеют некоторые недостатки. Некоторые процессы, происходящие в человеческом организме нельзя воссоздать искусственным способом.

Анализы могут показать уровень чувствительности бактерий к определенным антибиотикам, но стопроцентной информативности такие тесты не дают.

4. Расшифровка результатов

Процедура

Уровень достоверности результатов

Расшифровка результатов исследования

ПЦР

Высокая

Положительный – выявлен хеликтобактериоз; отрицательный – не выявлено ни одного типа хеликобактер пилори

Бактериологический анализ на чувствительность к антибактериальным препаратам

Низкая – на выявление антигена

Высокая – на определение чувствительности

Количество бактерий 0 – результат отрицательный, бактерии не выявлены; показатели больше 0 – определен хеликтобактериоз; R – устойчивость к определенному антибиотику; I – умеренная степень чувствительности к антибиотику; S – высокая степень чувствительности к антибиотику

Иммунологические методы

Низкая

Положительный – выявлен хеликтобактериоз; отрицательный – патогенная бактерия не выявлена

Источники

  • https://gradusnik.net/issledovanie-antigena-xelikobakter-pilori-v-kale/
  • https://lechenie-simptomy.ru/metody-issledovaniya-kala-na-helikobakter-pilori
  • https://vseozhivote.ru/kishechnik/defekatsiya/analiz-kala-na-helikobakter-pilori.html
  • http://JKTguru.ru/diagnostika/analiz-kala-helikobakter
  • https://gastrocure.net/bolezni/khelikobakter/analiz-kala-na-khelikobakter.html

[свернуть]
Помогла статья? Оцените её
1 Звезда2 Звезды3 Звезды4 Звезды5 Звезд
Загрузка...